滋肾清热利湿化瘀方治疗多囊卵巢综合征的网络药理学作用机制及实验研究

金　晶１，李佩双２，３，丁志玲３，彭佳华３，刘淑娟４，梁瑞宁２，３，５

（１．江西中医药大学研究生院，江西南昌　３３０００４；２．江西中医药大学附属医院，江西南昌　３３０００６；

３．江西中医药大学中医妇产科学研究所，江西南昌　３３０００６；４．江西中医药大学附属生殖医院，江西南昌　３３０００１；

５．江西中医药大学第二附属医院，江西南昌　３３０００６）

摘要：目的　采用网络药理学探讨滋肾清热利湿化瘀方（ＺｉｓｈｅｎＱｉｎｇｒｅＬｉｓｈｉＨｕａｙｕＰｒｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ，ＺＱＬＨＰ）治疗多囊卵巢综合征（ｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃｏｖａｒｙｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＰＣＯＳ）的作用机制，并进行实验验证。方法　基于网络药理学预测滋肾方的核心成分、靶基因和主要通路，对其中ＰＣＯＳ相关成分、靶基因、通路进行筛选；采用来曲唑（ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ，ＬＥＴ）诱导ＰＣＯＳ小鼠模型，观察滋肾方对ＰＣＯＳ小鼠的作用，并对网络药理学结果进行机制验证。结果　网络药理学结果表明，滋肾方４５６个成分中含有３６１个相关靶点，ＰＣＯＳ相关靶点１３９７个，交集靶点１２５个；获得槲皮素、豆甾醇、β-谷甾醇等主要活性成分与丝裂原活化蛋白激酶３（ｍｉｔｏｇｅｎ-ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅ３，ＭＡＰＫ３）、蛋白激酶１（ＡＫＴｓｅｒｉｎｅ／ｔｈｒｅｏｎｉｎｅｋｉｎａｓｅ１，ＡＫＴ１）和信号转导和转录激活因子３（ｓｉｇｎａｌｔｒａｎｓｄｕｃｅｒａｎｄａｃｔｉｖａｔｏｒｏｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ３，ＳＴＡＴ３）等核心靶点；ＧＯ分析得到ＢＰ６６３条目，ＣＣ６４条目，ＭＦ１１９条目，其中富集基因数量较多的条目为ｎｅｇａｔｉｖｅｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆａｐｏｐｔｏｔｉｃｐｒｏｃｅｓｓ，ｐｌａｓｍａｍｅｍｂｒａｎｅ，ｐｒｏｔｅｉｎｂｉｎｄｉｎｇ；ＫＥＧＧ分析显示潜在作用靶点主要富集在癌症信号通路、ＰＩ３Ｋ-ＡＫＴ和ＴＮＦ等信号通路；ＰＰＩ网络分析结果显示，ＭＡＰＫ３、ＡＫＴ１和ＳＴＡＴ３可能是滋肾方治疗ＰＣＯＳ的关键靶点。动物实验结果表明，与模型组比较，滋肾方组的小鼠的体重降低（Ｐ＜０.０５），且能有效改善ＰＣＯＳ模型小鼠的组织病理学表现，囊性卵泡数量降低（Ｐ＜０.０５），黄体数量增加（Ｐ＜０.０１）。降低卵巢组织中ＩＬ-１０水平（Ｐ＜０.０１），升高ＩＬ-６、ＴＮＦ-α水平（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１）。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和免疫组织化学（ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＩＨＣ）结果显示，ＰＣＯＳ小鼠卵巢组织ｐ-ＡＫＴ蛋白表达量下降（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１），ｐ-ｐ３８ＭＡＰＫ和ｐ-ＳＴＡＴ３蛋白表达较正常组升高（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１），而经滋肾方治疗后ｐ-ＡＫＴ蛋白表达上升（Ｐ＜０.０５），ｐ-ｐ３８ＭＡＰＫ和ｐ-ＳＴＡＴ３蛋白表达明显下降（Ｐ＜０.０５，Ｐ＜０.０１）。结论　滋肾方可能通过调控ＡＫＴ／ｐ３８ＭＡＰＫ／ＳＴＡＴ３信号改善来曲唑诱导的ＰＣＯＳ小鼠的炎性损伤。

关键词：滋肾清热利湿化瘀方；多囊卵巢综合征；网络药理学；机制；ＡＫＴ；ｐ３８ＭＡＰＫ；ＳＴＡＴ３

稿件来源：中医妇产科学研究所

部门审核：梁瑞宁

责任编辑：彭佳华